細(xì)胞增殖及毒性檢測是生物相容性測試的一種，檢測藥物或者新型材料在生物環(huán)境中的毒性情況，即通過檢測材料或者藥物對(duì)細(xì)胞的增殖或者生長的影響，來評(píng)價(jià)藥物或材料的毒性或者活性，主要用于藥物活性篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、抗腫瘤藥效測定等；常用MTT法或者CCK-8法檢測，另外也可以通過Live/dead雙染法進(jìn)行細(xì)胞成像，更直觀的記錄細(xì)胞的存活情況。

細(xì)胞增殖檢測實(shí)驗(yàn)的意義：

細(xì)胞增殖是細(xì)胞在周期調(diào)控的因子下，通過DNA復(fù)制等反應(yīng)，完成細(xì)胞分裂的過程。增殖檢測一般用于分析分裂中的細(xì)胞數(shù)量的變化，進(jìn)而反應(yīng)細(xì)胞的生長狀態(tài)及活性，目前廣泛應(yīng)用于腫瘤生物學(xué)，分子生物學(xué)，藥代動(dòng)力學(xué)等領(lǐng)域。

MTT法

在活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能將外源性MTT還原為不溶于水的藍(lán)紫色甲臢化合物，用二甲基亞砜（DMSO）將其溶解成溶液，用酶標(biāo)儀測定其濃度（OD490或者570)，從而定量測定細(xì)胞的存活比例，細(xì)胞增殖越多越快，對(duì)應(yīng)的吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，對(duì)應(yīng)的吸光度越低。

CCK-8法 

CCK-8細(xì)胞活性檢測試劑中含有WST-8 —— 一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以為線粒體內(nèi)的脫氫酶驗(yàn)明正身。在脫氫酶作用下，WST-8被還原生成橙黃色的甲瓚產(chǎn)物，用酶聯(lián)免疫檢測儀在OD 450nm波長處測定其光吸收值。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。

CCK8與MTT法的主要區(qū)別如下：

一、原理不同

1、Cell Counting Kit-8：CCK-8 試劑盒最先是由日本同仁化學(xué)研究所（Dojindo）開發(fā)的四唑鹽WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)。

2、MTT法：其檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲臜，用酶聯(lián)免疫檢測儀在570nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。

二、特點(diǎn)不同

1、Cell Counting Kit-8：靈敏度高，數(shù)據(jù)可靠，重現(xiàn)性好；操作簡便，省時(shí)省力；水溶性，不需要換液，尤其適合于懸浮細(xì)胞；無需放射性同位素和有機(jī)溶劑，對(duì)細(xì)胞毒性低；適合于高通量藥物篩選。

2、MTT法：特點(diǎn)是靈敏度高、經(jīng)濟(jì)。

目前市面上能提供的CCK-8試劑盒有國產(chǎn)，進(jìn)口分裝以及進(jìn)口原裝之分，國產(chǎn)的CCK-8試劑盒在質(zhì)量穩(wěn)定性不亞于進(jìn)口原裝，同樣具有較好的檢測結(jié)果，同時(shí)價(jià)格方面低于進(jìn)口原裝，具有高的性價(jià)比。